酵母菌化學(xué)感受態(tài)細胞 表達分析
簡要描述：
酵母菌化學(xué)感受態(tài)細胞 表達分析INVSc1菌株是一種快速生長的釀酒酵母菌，是一款非常理想的重組蛋白表達菌株，但因孢子生成能力弱，不適合用于基因分析研究。配套的質(zhì)粒有：pYES3/CT、pYC 2、pYES2系列。
產(chǎn)品時間：2026-06-12
打印當(dāng)前頁INVSc1 Chemically Competent Cell
酵母菌化學(xué)感受態(tài)細胞
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 | 價格（元） |
INVSc1 Chemically Competent Cell 酵母菌化學(xué)感受態(tài)細胞 | MF2372-1000UL | 10×100μl | 320 |
MF2372-5000UL | 50×100μl | 1360 |
產(chǎn)品包裝
組分編號 | 組分名稱 | 保存 | 貨號（規(guī)格） | |
MF2372-1000UL | MF2372-5000UL | |||
MF2372-A | INVSc1 Chemically Competent Cell | -80℃ | 10×100μl | 50×100μl |
MF2372-B | pYES2 Control Vector (10ng/μl) | -80℃ | 10μl | 10μl |
MF2372-C | Carrier DNA (10μg/μl) | -20℃ | 100μl | 500μl |
MF2372-D | PEG/LiAC Solution | +4℃ | 5ml | 25ml |
保存與運輸方法
保存：其中感受態(tài)細胞按標簽注明置于-80℃保存，三個月有效。其他組分按照標簽注明保存，一年有效。
運輸：干冰運輸。
產(chǎn)品描述
INVSc1菌株是一種快速生長的釀酒酵母菌，是一款非常理想的重組蛋白表達菌株，但因孢子生成能力弱，不適合用于基因分析研究。配套的質(zhì)粒有：pYES3/CT、pYC 2、pYES2系列。當(dāng)這些質(zhì)粒（比如：pYES2）與INVSc1菌配套使用，會激活pYES2質(zhì)粒上的GAL1啟動子的轉(zhuǎn)錄，進而啟動下游重組蛋白的表達。INVSc1是二倍體細胞，是組氨suan、亮氨suan、色氨suan、尿mi啶缺陷型菌株，可直接通過PEG/LiAc將pYES2質(zhì)粒轉(zhuǎn)化進入INVSc1細胞內(nèi)。質(zhì)粒pYES2的篩選標志為URA，可用SD-URA平板進行篩選。
本品為經(jīng)特殊工藝制備的INVSc1酵母菌化學(xué)感受態(tài)細胞，用pYES2質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率＞104 cfu/μg DNA。且在-80℃能穩(wěn)定保存三個月。
基因型
MATa his3Δ1 leu2 trp1-289 ura3-52/MATα his3Δ1 leu2 trp1-289 ura3-52
注意事項
1） 最好在冰上融化感受態(tài)細胞。
2） 轉(zhuǎn)化高濃度質(zhì)粒可相應(yīng)減少用于涂板的菌量。同時轉(zhuǎn)化2-3種質(zhì)粒可適當(dāng)增加質(zhì)粒的用量。
3） INVSc1對高溫敏感，最適生長溫度為27-30℃，一旦高于31℃，生長速度和轉(zhuǎn)化率都呈指數(shù)下降。
4） 酵母菌在缺陷培養(yǎng)基上生長速度比YPDA培養(yǎng)基慢，營養(yǎng)缺陷成分越多，生長越慢，以轉(zhuǎn)化涂板為例：涂YPDA平板于29℃，48h培養(yǎng)可見直徑1mm克隆；涂SD單缺平板于29℃，48-60h培養(yǎng)可見直徑1mm克隆；涂SD雙缺平板于29℃，60-80h培養(yǎng)可見直徑1mm克隆；涂SD三缺或四缺平板于29℃，80-90h培養(yǎng)可見直徑1mm克隆；
5） 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
使用方法
1） 取100 µl冰上融化的INVSc1化學(xué)感受態(tài)細胞，依次加入預(yù)冷的目的質(zhì)粒2-5 µg，預(yù)處理的Carrier DNA（95-100℃水浴3 min或95℃金屬浴5min，快速冰浴3min。重復(fù)一次。處理完快速插入冰中，待用。）10 µl，PEG/LiAc 500µl，用槍吹打幾次充分混勻，30℃水浴30 min（在15min時翻轉(zhuǎn)6-8次混勻）。
2） 之后將管子放42℃水浴15 min（在7.5min時翻轉(zhuǎn)6-8次混勻）。
3） 5000 rpm離心40s棄上清，用400 µl ddH2O重懸沉淀，離心30s棄上清。
4） 用50 µl ddH2O重懸，涂板，放入29℃培養(yǎng)48-96 h。
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貨號 | 名稱 | 規(guī)格 |
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MF2501-200T | Yeast Transformation Kit酵母轉(zhuǎn)化試劑盒 | 200T |
MS6303-350G | YPDA Agar Medium YPDA瓊脂培養(yǎng)基 | 350g |
MS6304-250G | YPDA Medium YPDA液體培養(yǎng)基 | 250g |
MS6367-5L | SD/-Ura Broth酵母缺陷型培養(yǎng)基（肉湯） | 10×0.5 L |
MS6368-5L | SD/-Ura with Agar酵母缺陷型培養(yǎng)基（瓊脂） | 10×0.5 L |
MS6319-10G | DO Supplement -Ura | 10g |
MS6305-100G | YNB Without Amino Acids酵母氮源基礎(chǔ)（無氨基酸） | 100g |
附錄I培養(yǎng)基配制
一、質(zhì)粒篩選用培養(yǎng)基：SD/-Ura培養(yǎng)基配制（1L）
酵母氮源基礎(chǔ)（YNB） 6.7g
葡萄糖 20g
氨基酸缺陷混合物（DOsupplement-Ura for pYES2） 適量（詳見說明書）
補水到1L，用1M NaOH調(diào)pH至5.8。
瓊脂粉（Agar） 20g（僅限固體培養(yǎng)基）
121℃，15min高壓滅菌。
二、蛋白誘導(dǎo)用培養(yǎng)基：SGR/-Ura培養(yǎng)基配制（1L）
酵母氮源基礎(chǔ)（YNB） 6.7g
氨基酸缺陷混合物（DOsupplement-Ura for pYES2） 適量（詳見說明書）
補水到800 mL，用1M NaOH調(diào)pH至5.8。
121℃，15min高壓滅菌。
待培養(yǎng)基溫度冷卻到55℃左右，加入已過濾的碳源：100ml 20%半乳糖，100m 10%棉子糖。混勻即可。
— —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】
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